Nhuộm Gram hay còn gọi là màu Gram là tên được đặt cho một loại nhuộm màu phân biệt được sử dụng trong lĩnh vực vi khuẩn học để hình dung các vi khuẩn, đặc biệt là trong các mẫu bệnh phẩm. Tên của màu này là do nhà vi khuẩn học người Đan Mạch Christian Gram, người chịu trách nhiệm phát triển kỹ thuật này vào năm 1884. Mục tiêu chính của Gram là đạt được một thử nghiệm cho phép ông phân biệt các nhóm vi khuẩn khác nhau để nghiên cứu chúng và xây dựng một phân loại chúng. Các thí nghiệm của Gran hóa ra rất thành công và anh ấy sẽ nhanh chóng thiết lập mình thành một kỹ thuật chính được sử dụng để nghiên cứu vi khuẩn, vì nó cho phép chúng được xác định một cách nhanh chóng và hiệu quả trong một bệnh nhiễm trùng và chọn loại kháng sinh thích hợp nhất để điều trị nhiễm trùng nói trên.
Quy trình tiến hành nhuộm như sau: việc đầu tiên là lấy mẫu vi khuẩn cần nhuộm màu, sau đó dùng tăm bông phết lên phiến kính rồi để khô ở nhiệt độ phòng hoặc nếu không đạt yêu cầu thì dùng bật lửa, đặc biệt cẩn thận để không đốt vi khuẩn. Sau đó, mẫu phải được cố định trên phiến kính bằng metanol trong khoảng 1 phút.
Sau đó đặt sắc thái của màu tím gentian trên slide và để yên trong 1 phút. Điều quan trọng là thuốc nhuộm này có khả năng vượt qua bất kỳ loại vách vi khuẩn nào và đó là lý do tại sao có thể nhuộm cả vi khuẩn Gram dương và âm tính. Sau đó, mẫu phải được rửa sạch bằng nước và sau đó thêm Lugol, sao cho chất này bao phủ toàn bộ mẫu và đợi trong một phút. Lugol là một hợp chất được tạo thành phần lớn từ iốt, trong trường hợp này, chất này có nhiệm vụ cố định thuốc nhuộm tím gentian vào mẫu.
Sau các bước được mô tả ở trên, phiến kính nên được rửa bằng hỗn hợp cồn và axeton trong khoảng thời gian khoảng 30 ngày, trong bước này, khi vết Gram thực sự kết thúc, điều này là do hỗn hợp cồn và axeton. chịu trách nhiệm hòa tan các phức chất của lugol và gentian violet.
